Определение концентрации хлорофилла
Вычисление скорости выделения О2 за 1 час по формуле: V (О2) = ДU*K*60мин/СХл, где ДUзначение изменения вольтажа за 1 минуту, Kкалибровочный коэффициент (мкМО2/мл*мин*В), СХлконцентрация хлорофилла (мг/мл). Значение калибровочного коэффициентавычисляется по специальному калибровочному графику (рис.7). Его значение равно665, 79 мкМО2/ мл*мин*В. За тем по графику (рис.6) нашли изменение напряжения… Читать ещё >
Определение концентрации хлорофилла (реферат, курсовая, диплом, контрольная)
BBY-препараты ФС-2 были получены по методу (RobinsonandYokum, 1980; Bertholdetal., 1981; FordandEvans, 1983). Определение концентрация хлорофилла в выделенных препаратах проводили при помощи спектрофотометрического метода, описанного в «Объектах и методах исследований».
На спектрофотометре (ShimadzuUV-1800)измеряется оптическая плотность (А) раствора при определенной длине волны 654 нм (данные приведены в табл.2).
Из значений таблицы 3 вычислили среднее значение концентрации хлорофилла 2,628 мг/мл, которое затем использовали при определении количеств препаратов, необходимых для измерения фотосинтетической активности и вычислении объёмов сред для обработки препаратов ФС-2 с целью получения фракции белков PsbP и PsbQ.
Измерение скорости выделения кислорода Скорость выделения кислорода является наиболее достоверным показателем функциональной активности ФС-2. Измерение проводили при рН 6.5. Концентрациюхлорофилла доводили до 10 мкг/мл. Скорость фотосинтетического выделения кислорода была рассчитана исходя из данныхграфика (рис.6).
Вычисление скорости выделения О2 за 1 час по формуле: V (О2) = ДU*K*60мин/СХл, где ДUзначение изменения вольтажа за 1 минуту, Kкалибровочный коэффициент (мкМО2/мл*мин*В), СХлконцентрация хлорофилла (мг/мл). Значение калибровочного коэффициентавычисляется по специальному калибровочному графику (рис.7). Его значение равно665, 79 мкМО2/ мл*мин*В. За тем по графику (рис.6) нашли изменение напряжения (В) за 1 минуту после включения света (начальная скорость на прямолинейном участке).
Рис. 6. График фотосинтетического выделения кислорода ФС-2. Стрелкой вверх показан момент включения света. Стрелка вниз — момент выключения света.
Скорость выделения кислорода составила 344,7 ± 12 мкМО2/ ч *мг/мл Для этого метода получения BBYмаксимальное значение для выделения кислорода показано порядка 600 мкМО2/ч*мг/мл, а среднее значение колеблется в пределах от 300 до 450 мкМО2/ч*мг/мл. Полученные нами данные свидетельствуют о достаточно хорошей функциональной активности ФС-2.
Рис. 7. Калибровочнаякривая для расчета скорости выделения кислорода