Питательные среды, их классификация

Питательные среды, предназначенные для культивирования микробов и изучения их свойств должны отвечать следующим требованиям:

достаток питательных веществ (источников органогенов, солей и т. д.);

стерильность (без этого трудно выделить чистую культуру, изучать ее свойства) оптимальное значение рН и буферность (противодействие сдвигу рН);

оптимальный окислительно-восстановительный потенциал (например, для анаэробов — низкий);

изотоничность (как у 0,9% раствора хлорида натрия);

влажность (для плотных сред);

прозрачность (для жидких сред);

определенная вязкость для плотных и полужидких сред (зависит от количества добавляемого агар-агара).

Искусственные питательные среды делят на: простые (основные) и сложные. На простых средах (пептонный бульон — ПБ, питательный агар — ПА растут многие микробы, их потребности удовлетворяются простым набором питательных веществ (мясной, рыбный или дрожжевой экстрат и пептон). Пептон является продуктом ферментативного расцепления белка, источником аминокислот. В экстрактах, помимо аминокислот и пептидов, содержатся витамины, соли, микроэлементы.

Сложные среды в зависимости от назначения делят на специальные, элективные (избирательные) и дифференциально-диагностические; все они, как правило, содержат дополнительные компоненты. Специальные среды имеют добавки, обогащающие среду факторами роста, и предназначены для высокотребовательных микробов. Например, стрептококки не растут на ПА, для них нужны специальные среды — сахарный бульон (ПБ + глюкоза) или кровяной агар (ПА + кровь); менингококки не растут на сахарном бульоне, но хорошо растут на сывороточном агаре (ПА + сыворотка крови). Стафилококки, кишечная палочка и другие менее требовательные микробы растут и на простых средах и на многих специальных.

На элективных средах растут микробы преимущественно одного вида. Рост других подавляется под влиянием специальных добавок (антибиотиков, жёлчи; щелочи и др.) или из-за обедненного состава среды. Эти среды используют для выделения чистых культур или накопления микробов определенных видов (сальмонеллы-в желчном бульоне, стафилококки — в солевом бульоне, холерные вибрионы — на щелочной пептонной воде и т. д.).

На дифференциально-диагностических средах один вид микроба можно отличить от другого по характеру роста и биохимическим свойствам. Их также используют при выделении чистых культур из смеси микробов или при идентификации выделенной культуры. Например, в состав среды Эндо кроме питательной основы входит лактоза, и индикатор фуксин (обесцвеченный). Микробы, не ферментирующие лактозу, не изменяют цвет среды, а расщепляющие лактозу окрашивают среду Эндо в красный цвет. Среды Гисса содержат набор углеводов и пептоны, которые предназначены для изучения сахаролитических и протеолитических ферментов в ходе идентификации микробных культур.