Представители эстрогенных гормонов

Таблица 7 — Сравнительная характеристика методов количественного определения.

Международная фармакопея для количественного определения этинилэстрадиола рекомендует спектрофотометрию, которая проводится следующим образом: около 0,05 г препарата (точная навеска) растворяют в достаточном количестве безводного этанола до получения 100 мл и разводят 10,0 мл этого раствора до 50,0 мл тем же растворителем. Измеряют поглощение разведенного раствора в кювете с толщиной слоя 1 см при максимуме 281 нм. Рассчитывают содержание С20Н24О2 в испытуемом веществе путем сравнения со стандартным образцом этинилэстрадиола СО, который исследуют одновременно аналогичным образом. Поглощение раствора стандартного образца в правильно откалиброванном спектрофотометре должно составлять 0,72±0,04 [10]. Японская фармакопея с этой же целью рекомендует алкалиметрическое титрование. Для этого взвешивают около 0,2 г этинилэстрадиола, предварительно высушив и растворив в 40 мл тетрагидрофурана. Добавляют 10 мл раствора нитрата серебра (1:20) и титруют 0,1 моль/л гидроксидом натрия. Точку эквивалентности определяют потенциометрически. Каждый мл 0,1 моль / л гидроксида натрия соответствует 29.64 мг C20H24O2 [11].

Количественное определение этинилэстрадиола по фармакопее США проводят с помощью ВЭЖХ. В качестве подвижной фазы используют профильтрованную и дегазированную смесь воды и ацетонитрила (1:1), а в качестве неподвижной — селикагель. Детектируют спектрофотометрически при 280 нм [14].

Для количественного определения эстрадиола бензоата Японская фармакопея рекомендует метод ВЭЖХ. В качестве подвижной фазы используют смесь ацетонитрила и воды (7:3). Неподвижная фаза представлена силикатным гелем. Детектор — ультрафиолетовый фотометр поглощения (длина волны 230 нм) [11]. Количественное содержание эстрадиола бензоата по Европейской и Британской фармакопеям определяют спектрофотометрическим методом. Для этого 25,0 мг исследуемого образца (точная навеска) растворяют в безводном этаноле до получения 250,0 мл раствора. Отмеривают 10,0 мл этого раствора и доводят до 100,0 мл этим же растворителем. Измеряют поглощение разведенного раствора в кювете с толщиной слоя 1 см при максимуме 231 нм. Рассчитывают содержание C25H28O3 в испытуемом веществе путем сравнения со стандартным образцом эстрадиола бензоата СО, который исследуют одновременно аналогичным образом [12, 13].