Методы проточной цитометрии

В настоящее время проточная цитометрия достаточно широко применяется в медицинских и биологических исследованиях. Развитие технического оснащения и методов метки клеток открыло уникальные и многочисленные возможности для измерения разных клеточных параметров и получения новых знаний о внутриклеточных механизмах. В гематологии проточные системы используют для быстрого автоматического счета форменных элементов крови, дифференциального анализа с подсчетом формулы крови и выделением атипичных клеток, фенотипирования клеток с применением моноклональных антител, изучения клеточного цикла и выявления анеуплоидных клеточных клонов[1]. Основной задачей проточной цитометрии является определение состава популяции по маркерам клеточной поверхности (фенотип клеточной поверхности). В клинической гематологии метод может быть использован для решения следующих задач:

иммунофенотипирования лимфоцитов, включая определение количества CD4, CD8 клеток и даже Тх1 и Тх2 (по продукции специфических цитокинов);

анализа процессов клеточной активации на основе определения маркеров ранней активации: CD25 (рецептор интерлейкина-2), CD38, CD69, CD71 (трансферриновый рецептор), CD95 (антиген апоптоза), CD122, анти-HLA-DR;

определения маркеров пролиферативной активности клеток иммунной системы (Ki-67, PCNA, Cyclin D3);

оценки внутриклеточной продукции цитокинов различными клеточными популяциями;

иммунофенотипирования острых лейкозов и лимфом;

анализа клеточного цикла с определением распределения клеточной популяции по фазам цикла (ДНК-цитометрия);

детекции и мониторирования минимальной резидуальной болезни (MRD);

анализа маркеров апоптоза (аннексина V, CD95 Fas/APO-1, CD95L, Bcl-2, P53).