Определение резус-принадлежности крови

Материальное оснащение: пробирка, пипетки Пастера, стандартный реагент антирезус Rh₀ (D), изотонический раствор NaCl, цельная донорская кровь, игла, спирт, вата.

Пробирочный метод:

На дно пробирки вносят 1 каплю стандартного реагента антирезус Rh₀ (D) и 1 каплю исследуемой крови (или эритроцитов). Содержимое пробирки перемешивают встряхиванием и затем медленно поворачивают, наклоняя пробирку почти до горизонтали таким образом, чтобы содержимое растекалось по ее стенкам. Такое размазывание крови по стенкам пробирки делает реакцию более выраженной. Как правило, агглютинация наступает в течение 1-й минуты, но для образования устойчивого комплекса антиген+антитело и четко выраженной агглютинации, а также ввиду возможности замедленной реакции при слабо выраженной агглютинабельности эритроцитов контакт эритроцитов с реагентом при повертывании пробирки следует проводить не менее 3 мин. Затем для исключения неспецифической агрегации эритроцитов в пробирку добавить 2−3 мл изотонического раствора NaCl и перемешать, не взбалтывая, путем 2−3-кратного перевертывания пробирки. Если агрегация эритроцитов была неспецифической, то после добавления изотонического раствора она исчезает. Наличие агглютинации оценивается визуально, в неясных случаях проводят микрокопирование.

Оценка результатов Наличие агглютинации в виде крупных хлопьев из эритроцитов на фоне просветленной жидкости указывает на резус-положительную принадлежность исследуемой крови (Rh⁺), содержащей антиген Rh₀ (D).

Отсутствие агглютинации (в пробирке гомогенно окрашенная жидкость) указывает на резус-отрицательную принадлежность исследуемой крови (Rh^-). Такая кровь не содержит антиген Rh₀ (D).

Результат учитывается как истинный после проверки контрольных образцов, т. е. при положительном результате со стандартными резус-положительными эритроцитами той же группы или группы 0 (I) по системе АВ0 и отсутствии агглютинации со стандартными резус-отрицательными эритроцитами, одногруппными с исследуемой кровью по системе АВ0.

Выражение практического результата Резус-принадлежность крови выражается буквенным обозначением и расшифровкой при обязательном указании группы крови по системе АВ0. Например: кровь испытуемого (донора) (Ф.И.О.) группы 0 (I) резус Rh⁺ (положительная).