ΠΠ΅Π½Π½Π°Ρ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΡ.
ΠΠΎΡΡΠΈΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ Π³Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΠΈ ΠΈ Π±ΠΈΠΎΡΠ΅Ρ
Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ
ΠΠ° ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄Π½ΠΈΠ΅ 10—15 Π»Π΅Ρ Π±ΡΠ»ΠΈ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π½Ρ ΠΏΡΠΈΠ½ΡΠΈΠΏΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΠΎ Π½ΠΎΠ²ΡΠ΅ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Ρ ΠΌΠ°Π½ΠΈΠΏΡΠ»ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Ρ Π½ΡΠΊΠ»Π΅ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΠΌΠΈ ΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ°ΠΌΠΈ in vitro, Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ Π·Π°ΡΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΡΡ ΠΈ Π±ΡΡΠ½ΠΎ ΡΠ°Π·Π²ΠΈΠ²Π°Π΅ΡΡΡ Π½ΠΎΠ²ΡΠΉ ΡΠ°Π·Π΄Π΅Π» ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΠΎΠΉ Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ ΠΈ Π³Π΅Π½Π΅ΡΠΈΠΊΠΈ — Π³Π΅Π½Π½Π°Ρ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΡ. ΠΡΠΈΠ½ΡΠΈΠΏΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠΈΠ΅ Π³Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΠΈ ΠΎΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π²ΡΠΈΡ ΡΡ ΡΠ°Π½Π΅Π΅ ΡΡΠ°Π΄ΠΈΡΠΈΠΎΠ½Π½ΡΡ ΠΏΡΠΈΠ΅ΠΌΠΎΠ² ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠΎΡΡΠΎΠΈΡ Π² ΡΠΎΠΌ, ΡΡΠΎ ΠΎΠ½Π° Π΄Π°Π΅Ρ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡΡ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΠΎ… Π§ΠΈΡΠ°ΡΡ Π΅ΡΡ >
ΠΠ΅Π½Π½Π°Ρ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΡ. ΠΠΎΡΡΠΈΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ Π³Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΠΈ ΠΈ Π±ΠΈΠΎΡΠ΅Ρ Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ (ΡΠ΅ΡΠ΅ΡΠ°Ρ, ΠΊΡΡΡΠΎΠ²Π°Ρ, Π΄ΠΈΠΏΠ»ΠΎΠΌ, ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»ΡΠ½Π°Ρ)
ΠΠ° ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄Π½ΠΈΠ΅ 10—15 Π»Π΅Ρ Π±ΡΠ»ΠΈ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π½Ρ ΠΏΡΠΈΠ½ΡΠΈΠΏΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΠΎ Π½ΠΎΠ²ΡΠ΅ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Ρ ΠΌΠ°Π½ΠΈΠΏΡΠ»ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Ρ Π½ΡΠΊΠ»Π΅ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΠΌΠΈ ΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ°ΠΌΠΈ in vitro, Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ Π·Π°ΡΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΡΡ ΠΈ Π±ΡΡΠ½ΠΎ ΡΠ°Π·Π²ΠΈΠ²Π°Π΅ΡΡΡ Π½ΠΎΠ²ΡΠΉ ΡΠ°Π·Π΄Π΅Π» ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΠΎΠΉ Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ ΠΈ Π³Π΅Π½Π΅ΡΠΈΠΊΠΈ — Π³Π΅Π½Π½Π°Ρ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΡ. ΠΡΠΈΠ½ΡΠΈΠΏΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠΈΠ΅ Π³Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΠΈ ΠΎΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π²ΡΠΈΡ ΡΡ ΡΠ°Π½Π΅Π΅ ΡΡΠ°Π΄ΠΈΡΠΈΠΎΠ½Π½ΡΡ ΠΏΡΠΈΠ΅ΠΌΠΎΠ² ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠΎΡΡΠΎΠΈΡ Π² ΡΠΎΠΌ, ΡΡΠΎ ΠΎΠ½Π° Π΄Π°Π΅Ρ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡΡ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΠΎ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠ΅ Π³Π΅Π½Π΅ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΡΡΡΡΠΊΡΡΡΡ in vitro Π² ΡΠΎΡΠΌΠ΅ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½ΡΠ½ΡΡ ΠΠΠ. ΠΠΎΠ½ΡΡΠΈΡ «Π³Π΅Π½Π½Π°Ρ» ΠΈ «Π³Π΅Π½Π΅ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠ°Ρ» ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΡ ΡΠ°ΡΡΠΎ ΡΠΏΠΎΡΡΠ΅Π±Π»ΡΡΡ ΠΊΠ°ΠΊ ΡΠΈΠ½ΠΎΠ½ΠΈΠΌΡ, Ρ ΠΎΡΡ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄Π½Π΅Π΅ ΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΡΠΈΡΠΎΠΊΠΈΠΌ ΠΈ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°Π΅Ρ ΠΌΠ°Π½ΠΈΠΏΡΠ»ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π½Π΅ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ Ρ ΠΎΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ½ΡΠΌΠΈ Π³Π΅Π½Π°ΠΌΠΈ, Π½ΠΎ ΠΈ Ρ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΠΊΡΡΠΏΠ½ΡΠΌΠΈ ΡΠ°ΡΡΡΠΌΠΈ Π³Π΅Π½ΠΎΠΌΠ°. Π Π°Π±ΠΎΡΠ° ΠΏΠΎ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π΅Π»ΠΊΠ΅ Π³Π΅Π½ΠΎΡΠΈΠΏΠ° ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡΠ½ΡΡ ΠΈΠ»ΠΈ ΡΠ°ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠΉ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΡΠΊΡΠ΅ΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠΉ ΠΎΠ³ΡΠ°Π½ΠΈΡΠ΅Π½Ρ ΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π°ΠΌΠΈ Π²ΠΈΠ΄Π° Π»ΠΈΠ±ΠΎ Π±Π»ΠΈΠ·ΠΊΠΈΡ Π² Π²ΠΈΠ΄ΠΎΠ²ΠΎΠΌ ΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ ΡΠΎΡΠΌ. ΠΠ°ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ², Π³Π΅Π½Π½Π°Ρ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΡ, ΠΊΠ°ΠΊ Π±ΡΠ΄Π΅Ρ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΎ Π½ΠΈΠΆΠ΅, ΡΡΠΈΡΠ°Π΅Ρ ΠΌΠ΅ΠΆΠ²ΠΈΠ΄ΠΎΠ²ΡΠ΅ Π±Π°ΡΡΠ΅ΡΡ, ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ²Π°Ρ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡΡ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π½ΠΈΡ ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠΎΠ² Ρ Π½ΠΎΠ²ΡΠΌΠΈ, Π² ΡΠΎΠΌ ΡΠΈΡΠ»Π΅ ΠΈ Π½Π΅ Π²ΡΡΡΠ΅ΡΠ°ΡΡΠΈΠΌΠΈΡΡ Π² ΠΏΡΠΈΡΠΎΠ΄Π΅, ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°ΡΠΈΡΠΌΠΈ Π½Π°ΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΡΡ ΡΠ²ΠΎΠΉΡΡΠ². ΠΠ΅Π½Π½Π°Ρ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΡ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ ΡΠΎΠ²ΠΎΠΊΡΠΏΠ½ΠΎΡΡΡ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄ΠΎΠ², ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΡΡΠΈΡ Π½Π΅ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ°ΡΡ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠ½Π±ΠΈΠ½Π°Π½ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΠΠ ΠΈΠ· ΡΡΠ°Π³ΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ² Π³Π΅Π½ΠΎΠΌΠΎΠ² ΡΠ°Π·Π½ΡΡ ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠΎΠ², Π½ΠΎ ΠΈ Π²Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΡ ΡΠ°ΠΊΠΈΠ΅ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»Ρ Π² ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΡ, ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π²Π°Ρ ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡ Π΄Π»Ρ ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΠΈ Π² Π½Π΅ΠΉ Π²Π²Π΅Π΄Π΅Π½Π½ΡΡ , ΡΠ°ΡΡΠΎ ΡΠΎΠ²Π΅ΡΡΠ΅Π½Π½ΠΎ ΡΡΠΆΠ΅ΡΠΎΠ΄Π½ΡΡ Π³Π΅Π½ΠΎΠ². Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠΌ, Π² ΡΡΠΎΠΌ ΡΠ»ΡΡΠ°Π΅ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»Ρ ΠΎΠΏΠ΅ΡΠΈΡΡΠ΅Ρ Π½Π΅ΠΏΠΎΡΡΠ΅Π΄ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ Ρ Π³Π΅Π½Π°ΠΌΠΈ, ΠΏΡΠΈΡΠ΅ΠΌ ΠΈΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΡ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π½Π΅ Π·Π°Π²ΠΈΡΠ΅ΡΡ ΠΎΡ ΡΠ°ΠΊΡΠΎΠ½ΠΎΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΎΠ΄ΡΡΠ²Π° ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΠΌΡΡ ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠΎΠ². ΠΡΠ° ΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎΡΡΡ Π³Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΠΈ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ Π΅Π΅ Π³Π»Π°Π²Π½ΠΎΠ΅ ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠΈΠ΅ ΠΎΡ ΡΠ°Π½Π΅Π΅ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π²ΡΠΈΡ ΡΡ ΠΏΡΠΈΠ΅ΠΌΠΎΠ² ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΡ Π³Π΅Π½ΠΎΡΠΈΠΏΠ°.
ΠΠ΅ΡΠ²Π΅Π½ΡΡΠ²ΡΡΡΡΡ ΡΠΎΠ»Ρ Π² ΡΠΎΡΠΌΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ Π³Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΠΈ ΡΡΠ³ΡΠ°Π»Π° Π³Π΅Π½Π΅ΡΠΈΠΊΠ° ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠΎΠ², ΠΈΠ΄Π΅ΠΈ ΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Ρ, ΡΠ°Π·ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°Π½Π½ΡΠ΅ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΠΎΠΉ Π³Π΅Π½Π΅ΡΠΈΠΊΠΎΠΉ ΠΈ Ρ ΠΈΠΌΠΈΠ΅ΠΉ Π½ΡΠΊΠ»Π΅ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΡ ΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ. Π€ΠΎΡΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ Π΄Π°ΡΠΎΠΉ ΡΠΎΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΡ Π³Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΠΈ ΡΡΠΈΡΠ°ΡΡ 1972 Π³., ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° Π³ΡΡΠΏΠΏΠ° Π. ΠΠ΅ΡΠ³Π° Π² Π‘Π¨Π ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π»Π° ΠΏΠ΅ΡΠ²ΡΡ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½ΡΠΈΡΡ ΠΠΠ in vitro, ΠΎΠ±ΡΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΠ²ΡΡΡ Π² ΡΠ²ΠΎΠ΅ΠΌ ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π΅ Π³Π΅Π½Π΅ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΉ ΠΌΠ°ΡΠ΅ΡΠΈΠ°Π» ΠΈΠ· ΡΡΠ΅Ρ ΠΈΡΡΠΎΡΠ½ΠΈΠΊΠΎΠ²: ΠΏΠΎΠ»Π½ΡΠΉ Π³Π΅Π½ΠΎΠΌ ΠΎΠ½ΠΊΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π²ΠΈΡΡΡΠ° ΠΎΠ±Π΅Π·ΡΡΠ½ SV40, ΡΠ°ΡΡΡ Π³Π΅Π½ΠΎΠΌΠ° ΡΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π±Π°ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΠΎΡΠ°Π³Π° Π ΠΈ Π³Π΅Π½Ρ Π³Π°Π»Π°ΠΊΡΠΎΠ·Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠΏΠ΅ΡΠΎΠ½Π° Π. coli. Π‘ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½Π°Ρ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½ΡΠ½Π°Ρ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»Π° Π½Π΅ Π±ΡΠ»Π° ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½Π° Π½Π° ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΡ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡ, ΠΏΠΎΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΡ Ρ Π°Π²ΡΠΎΡΠΎΠ² ΡΡΠΎΠΉ ΡΠ°Π±ΠΎΡΡ Π²ΠΎΠ·Π½ΠΈΠΊΠ»ΠΈ ΠΎΠΏΠ°ΡΠ΅Π½ΠΈΡ, ΡΡΠΎ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Ρ Π³Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΠΈ ΠΌΠΎΠ³ΡΡ ΠΏΡΠΈΠ²Π΅ΡΡΠΈ ΠΊ ΠΏΠΎΡΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠΎΠ², ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΡΡ Π΄Π»Ρ Π·Π΄ΠΎΡΠΎΠ²ΡΡ ΡΠ΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ°, Π½Π°ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ Π±Π°ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΠΉ Π. coil, ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΡΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½Π΅ΡΡΠΈ ΠΎΠ½ΠΊΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΡΠ΅ Π²ΠΈΡΡΡΡ ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡΠ½ΡΡ Π² ΠΊΠΈΡΠ΅ΡΠ½ΠΈΠΊ ΡΠ΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ°. Π Π°Π·ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°Π½Π½ΡΠ΅ ΠΏΠΎΠ·Π΄Π½Π΅Π΅ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»Π° ΡΠ°Π±ΠΎΡΡ Ρ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½ΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»Π°ΠΌΠΈ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡΠ°ΠΊΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ ΡΡΡΡΠ°Π½ΠΈΡΡ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡΡ Π²ΡΠ΅Π΄Π½ΡΡ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΠ²ΠΈΠΉ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π½ΠΈΡ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Π½ΡΠ½ΡΡ ΠΠΠ, ΠΎΠ±ΡΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΡΡΡΠΈΡ Π² ΡΠ²ΠΎΠ΅ΠΌ ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π΅ Π³Π΅Π½Ρ ΡΠ°Π·Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΡΠΎΠΈΡΡ ΠΎΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΡ.