Определение уровня ПСА общего — диагностика заболевания и контроль эффективности терапии/
Для реализации использованы два моноклональных антитела с разной специфичностью к двум доменам молекулы ПСА: первые антитела иммобилизированы на твердой фазе, вторые (меченные пероксидазой хрена) входят в состав коньюгата. В лунках планшета во время инкубации происходит одновременное связывание содержащегося в исследуемом образце ПСА с антителами, иммобилизированными на твердой фазе… Читать ещё >
Определение уровня ПСА общего — диагностика заболевания и контроль эффективности терапии/ (реферат, курсовая, диплом, контрольная)
Принцип действия «сэндвич» — варианта твердофазного ИФА
Для реализации использованы два моноклональных антитела с разной специфичностью к двум доменам молекулы ПСА: первые антитела иммобилизированы на твердой фазе, вторые (меченные пероксидазой хрена) входят в состав коньюгата. В лунках планшета во время инкубации происходит одновременное связывание содержащегося в исследуемом образце ПСА с антителами, иммобилизированными на твердой фазе, и антителами, конъюгированными с пероксидазой хрена.
Количество связавшегося конъюгата прямо пропорционально количеству общего ПСА в образце сыворотки крови.
Во время инкубации с ТМБ-субстратным раствором происходит окрашивание раствора в лунках. Степень окраски прямо пропорциональна количеству общего ПСА в образце сыворотки крови. После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочного графика рассчитывается концентрация общего ПСА в исследуемых образцах.
Используемые реагенты
Иммуносорбент — планшет с иммобилизированными на дне лунок МА к общему ПСА. кровь иммуносорбент антиген сыворотка Конъюгат — МА к общему ПСА, конъюгированные с пероксидазой хрена.
Калибровочные пробы 0, 1, 2, 3, 4, 5.
Контрольная сыворотка — сыворотка с известным содержанием ПСА.
ПР — промывочный раствор.
ТМБ — субстраный раствор, тетраметилбензидил.
Стоп — реагент — сильная кислота.