Описание Гибридного вектора генной терапии: AAVP

Геном гибридного вектора был разработан путем вставки модифицированного трансгена AAV (рекомбинантный AAV AAV) в межгеномную область генома фага, под регуляцией промотора CMV и окружив его полными инвертированными концевыми повторами (ITR) от 2го серотипа AAV (рис.1). Использование ITR от AAV в прицельном AAVP (RGD4C-AAVP) улучшает эффективность трансдукции и улучшает экспрессию трансгена с помощью образования и поддержания конкатемеров эукариотических трансгенных кассет. Экспрессия трансгена HSVtk под контролем промотора CMV (RGD4C-AAVPCMV-HSVtk) и последующее лечение GCV (ганцикловиром) вызывает значительную суппрессию опухолей в мышах и крысах.

Вектор находился в исследованиях, в том числе доклинических, с самого момента своего создания. Национальный Институт Рака США использовал лиганд-прицельное действие RGD4C-AAVP для того, чтобы доставить фактор некроза опухолей альфа (ФНО-а) в сосудистое русло ксенографтов человеческой меланомы в голых мышах. В данном эксперименте, системное использование этой фаговой частицы привело к прицельному действию на сосуды опухолей, что привело к выраженной экспрессии ФНО-а в них с последующим апоптозом эндотелеоцитов и значительной задержкой роста опухоли, в то же время отмечалось полное отсутствие этого эффекта во всех других тканях и органах, включая печень и селезенку (хотя в этих двух органах и были обнаружены частицы RGD4C-AAVP). Схожая эффективность данного вектора была достигнута и в экспериментах на одомашенных собаках с саркомой мягких тканей. Внутривенное введение фаговой частицы (в том числе мультидозовое) приводило только лишь к прицельному действию на опухоль. Повторные введения вектора привело к полной эрадикации опухолей у нескольких собак и стабильности у других, несмотря на наличие выраженного иммунного ответа на фаговые частицы — несмотря на иммуногенное действие у собак и иммунокомпетентных мышей, повторные введения данных векторов оказывают выраженный противоопухолевый эффект.

Специфичность и безопасность RGD4C-AAVP делают данный гибридный вектор многообещающим инструментом в системной генной терапии рака.