Оценка влияния глутамилгистидина на гематотоксичность и противоопухолевую и антиметастатическую эффективность циклофосфана у мышей с карциномой легкого Льюис

ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ г-ГЛУТАМИЛГИСТИДИНА НА ГЕМАТОТОКСИЧНОСТЬ И ПРОТИВООПУХОЛЕВУЮ И АНТИМЕТАСТАТИЧЕСКУЮ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЦИКЛОФОСФАНА У МЫШЕЙ С КАРЦИНОМОЙ ЛЕГКОГО ЛЬЮИС

Сипров А.В., Инчина В. И., Белоус Е.А.

При современной высокодозной химиотерапии, обеспечивающей значительный прогресс в лечении многих онкологических заболеваний, высокая токсичность противоопухолевых средств является лимитирующим фактором проведения эффективного лечения. Уменьшение побочных эффектов цитостатиков без ослабления их противоопухолевой эффективности является актуальной задачей, решение которой позволит существенно улучшить качество жизни больных.

В структуре осложнений современной химиотерапии одним из основных и частых побочных эффектов является выраженная миелодепрессия. онкологический циклофосфан льюис карцином Целью работы явилось оценить влияние г-глутамилгистидина (г-ГГ) на гематологическую токсичность, а также противоопухолевую и антиметастатическую эффективность циклофосфана у мышей линии С57BL/6 с карциномой легкого Льюис (LLC).

Материалы и методы: опыты с карциномой легкого Льюис (LLC) проводились на мышах-самках линии C57Bl/6 массой 20−22 г. Суспензию клеток LLC вводили в/м в область бедра (по 10⁶ клеток в растворе Хенкса). В контроле № 1 животные не подвергались лечению, в контроле № 2 — получали монотерапию циклофосфаном (ЦФ), который вводился в дозе 100 мг/кг внутрибрюшинно 2 раза с интервалом 96 часов, начиная с 7-х суток эксперимента. В 3-ей группе животные с карциномой легкого Льюис получали циклофосфан в сочетании с г-ГГ в дозе 1 мг/кг, который вводился внутримышечно, начиная с 7-х суток после имплантации опухолевых клеток в течение 14 дней.

Для оценки гематологической токсичности у части животных на 14-е сутки опыта под эфирным наркозом производился забор крови с последующим определением содержания эритроцитов, гемоглобина, тромбоцитов и лейкоцитов. Также у животных выделяли костный мозг из бедренной кости и на предметном стекле приготавливали мазок костного мозга.

На 22-е сутки после трансплантации опухолевых клеток животные подвергались эвтаназии под эфирным наркозом. Материалами исследования явились кровь, опухолевый узел и легкие мышей. В крови определяли количество форменных элементов. Эффективность лечения оценивали по индексу торможению роста опухоли (ИТРО), который рассчитывали по массе опухоли. В легких подсчитывали число поверхностных метастазов и рассчитывали индекс ингибирования процесса метастазирования (ИИМ).

Как показали исследования, на 14-е сутки эксперимента в процессе опухолевого роста у мышей с LLC развивались анемия и лейкопения. Химиотерапия ЦФ усугубляла анемию и лейкопению: содержание эритроцитов и гемоглобина снижалось на 23,9% и 17,1% (р<0,05) соответственно, а количество лейкоцитов на 65%, преимущественно за счет лимфоцитов, по сравнению с нелеченными животными. В серии с совместным введением ЦФ и г-ГГ уровень гемоглобина был выше на 21,4% при отсутствии различий в количестве эритроцитов по сравнению с группой, получавших один ЦФ. г-ГГ достоверно уменьшал также степень тяжести лейкопении: количество лейкоцитов в серии с комбинированным введением ЦФ и г-ГГ было на 58,5% выше, чем при использовании ЦФ в монорежиме.

К 22-м суткам развивалась тромбоцитопения как в группе LLC без лечения, так и в группе с монотерапией цитостатиком, при этом терапия ЦФ углубляла тромбоцитопению на 24,6% в сравнении с нелеченными опухоленосителями. г-ГГ достоверно корригировал тромбоцитопению: количество тромбоцитов увеличивалось на 20,8% по отношению к серии с введением одного ЦФ.

Клеточный состав костного мозга мышей с LLC без лечения к 14-м суткам не отличался от такового у интактных животных. У мышей с монотерапией ЦФ к этому времени наблюдалось увеличение пролиферативной активности незрелых гранулоцитов и торможение процессов дифференцировки, что выражалось в нарастании в костном мозге бластных (в 3 раза) и созревающих форм (миелоцитов и метамиелоцитов в 2,6 и 5,4 раза соответственно) и сокращении количества сегментоядерных нейтрофилов в 5,2 раза в сравнении с нелеченными животными. Количество полихроматофильных нормоцитов уменьшалось в 2 раза по сравнению с интактными мышами при отсутствии различий с группой LLC. В серии с сочетанным введением ЦФ и г-ГГ отмечалось достоверное увеличение числа метамиелоцитов в 1,77 раза, сегментоядерных нейтрофилов в 1,5 раза и уменьшение количества палочкоядерных нейтрофилов до уровня здоровых мышей по сравнению с животными, получавшими только ЦФ. При этом костный мозг у всех групп животных был клеточным.

Исследование сочетанного воздействия ЦФ и г-ГГ на карциному легкого Льюис показало, что в группе с комбинированным лечением индекс торможения роста первичного опухолевого узла, среднее число метастазов в легких и индекс ингибирования процесса метастазирования не отличались от таковых показателей в серии с монотерапией ЦФ (табл. 1).

Таблица 1. Влияние комбинированного применения циклофосфана и г-ГГ на рост и метастазирование карциномы легкого Льюис у мышей.

Примечание: во всех группах различия с LLC достоверны Таким образом, г-ГГ ослабляет гематологическую токсичность циклофосфана, уменьшая степень тяжести лейкопении и тромбоцитопении и увеличивая в костном мозге количество сегментоядерных нейтрофилов с нормализацией числа палочкоядерных. При этом г-ГГ при совместном применении с циклофосфаном не влияет на его противоопухолевую и антиметастатическую эффективность.